GDF-8 1mg/병 코어 소개
미오스타틴|변환 성장 인자- 슈퍼패밀리 멤버 1mg/바이알
일반 이름: 미오스타틴(성장분화인자-8)
영어 이름: 미오스타틴(성장분화인자 8, GDF-8)
단백질 구조: 성숙한 펩타이드는 동종이량체로 각 사슬에 약 110개의 아미노산이 들어있습니다.
분자량: 약 25 kDa (단량체 형태)
청정: 90% 이상(SDS-PAGE/HPLC)
콘텐츠: 1mg/병
모습: 백색의 동결건조분말
저장: -80도에서 냉동하시고 차광하여 건조한 곳에 보관하세요.
사용 및 보관 안내
GDF-8(미오스타틴):
변환 성장 인자- 수퍼패밀리의 구성원인 GDF-8은 주로 골격근에서 발현됩니다. 근육 성장의 음성 조절제로서 액티빈 수용체 IIB/ALK4/5 신호 전달 경로에 결합하여 근아세포의 증식과 분화를 억제함으로써 골격근량을 정밀하게 조절합니다. 근육 성장을 위한 주요 음성 피드백 신호 단백질로서 이는 근육 발달, 재생, 위축(예: 암 악액질 및 노화 관련 근육감소증) 및 대사 질환의 실험 모델에서 중심 역할을 합니다. 동화작용 촉진 인자와 비교하여, 그것의 부정적인 규제 특성은 근육 항상성의 균형 메커니즘을 이해하기 위한 독특한 관점을 제공합니다.
근육 성장에 있어 중요한 부정적 조절 역할로 인해 GDF{2}}8은 근육 생물학, 재생 의학, 운동 생리학 및 대사 질환 분야의 연구자들에 의해 널리 사용됩니다. 유전자 녹아웃 모델과 비교하여, 재조합 단백질 형태는 억제 신호의 강도를 정확하게 제어하고 시험관 내 및 생체 내에서 용량-반응 및 시간 과정을 연구하기 위한 표준화된 실험 도구를 제공합니다. 근육 재생 장애 연구, 근육 위축 모델 및 근육-지방 상호 작용과 관련된 대사 연구에 대한 적용은 GDF-8 경로를 목표로 하는 잠재적 개입 전략을 평가하기 위한 기초를 제공합니다.
GDF-8 애플리케이션:
근육 성장의 고전적인 음성 조절제로서 근육 성장 억제 신호를 정확하게 시뮬레이션하거나 향상시키기 위해 시험관 내 및 생체 내 모델에서 사용되어 근모세포 증식, 분화, 골격근 질량 및 기능에 대한 억제 효과를 연구합니다. 이는 주로 근육 위축, 근육 재생 장애, 근육과 다른 조직(예: 지방 및 뼈) 간의 상호 작용의 분자 메커니즘을 탐색하는 데 사용됩니다.
근위축 모델, 근아세포/위성세포 기능 연구, 근육 재생 실험, 비만 및 당뇨병과 관련된 근육 대사 장애 연구에 널리 사용됩니다. 표준화된 재조합 단백질 형태는 새로운 항근위축 약물을 평가하고, 운동 적응의 분자 기반을 연구하고, GDF-8 신호 전달을 목표로 하는 치료 전략을 탐색하기 위한 핵심 연구 도구를 제공합니다.
사용 및 보관방법
1. 재구성 및 준비:
권장 용매:
선호하는 용매: pH 4.0-5.0(예: 20mM 아세트산)으로 아세트산 용액을 희석합니다.
키 캐리어: 운반 단백질을 첨가해야 합니다.용매 및 모든 희석제에;0.1% 소 혈청 알부민(BSA)을 함유한 멸균 아세트산 용액을 권장합니다.
작업 용액 희석: 생리학적 pH로 희석합니다.0.1-1% BSA를 함유한 멸균 PBS 또는 세포 배양 배지.
절대 금지: 순수한 물, 중성 PBS 또는 담체 단백질이 없는 용액을 사용하여 단백질을 직접 용해하거나 희석하는 것은 엄격히 금지되어 있습니다.그렇지 않으면 돌이킬 수 없는 단백질 응집, 침전 및 비활성화가 발생합니다.
표준 준비 절차:
용매 준비:
0.1% BSA(또는 더 높은 순도의 담체 단백질)를 함유한 20mM 멸균 아세트산 용액을 준비하고 0.22μm 필터 멤브레인을 통해 필터링합니다.
용매는 사용하기 전에 얼음 위에서 미리-냉각시켜야 합니다.
재구성 절차:
얼음 위에서 절차를 수행하십시오. 미리 냉각된 산성 담체 단백질 용매 1.0mL를-1mg 바이알에 추가합니다.
마이크로피펫을 사용하여 병 벽을 따라 매우 천천히 샘플을 주입하여 기포 발생이나 동결{0}}건조 케이크에 직접적인 영향을 주지 않도록 하세요.
바이알을 얼음 위에 놓고5~10분 동안 수평으로 천천히 회전시킵니다.분말이 완전히 녹을 때까지.휘젓거나 흔들거나 불어넣거나 심하게 휘젓지 마세요..
최종 농도: 1mg/mL(약 40μM) 산성 스톡 용액.
분배 및 기울기 희석:
얼음 위에 저흡착 실란화 원심분리 튜브를 사용하여 2-10 μL의 단일 용량을 즉시 분주합니다.
희석 시 먼저 산성 원액을 PBS 또는 0.1~1% BSA가 함유된 배양배지로 100배 이상 희석하여 pH를 중화시키십시오. 예를 들어, 1 μL의 스톡 용액을 1% BSA가 포함된 99 μL의 PBS에 추가하여 10 ug/mL의 중간 용액을 얻습니다.
그런 다음 중간 용액을 최종 작업 농도로 희석합니다. 모든 희석 단계는 얼음 위에서 수행됩니다.
명확하게 라벨이 붙어 있습니다: GDF-8, 농도, pH, 준비 날짜, 배치 번호, 보관 온도.
작업 농도 참고:
체외 세포 실험: 일반적으로 사용되는 농도 범위는 0.1~5 ug/mL(대략 4~200 nM)이며, 세포 종류 및 실험 목적에 따라 최적화가 필요합니다.
생체 내 동물 실험: 문헌에 근거하여 모델 및 투여경로(복강내, 근육내, 정맥내)에 따라 용량을 엄격히 결정해야 한다. 일반적으로 사용되는 범위는 ug/kg ~ mg/kg 범위입니다.사전 실험을 해야 한다.
계산예: 100ng/mL 작업용액을 준비하려면 10ug/mL 중간용액 1μL를 취하여 100μL의 배양액에 첨가합니다.
주목해야 할 핵심 사항:
낮은 온도와 부드러움: 전체 과정은 얼음 위에서 이루어져야 하며 움직임은 극도로 부드러워야 합니다.단백질 변성을 방지하기 위해
강제 산 용해: 산성 완충용액(pH 4~5)에 녹여야 합니다.이는 용해도와 활성을 유지하는 데 중요합니다.
강제 운반 단백질: BSA와 같은 담체 단백질이 포함된 용액을 사용하여 용해 및 희석을 수행해야 합니다.흡착과 응집을 방지하기 위해
동결{0}}해동 주기는 엄격히 금지됩니다.: 반복적인 동결-해동 주기는 엄격히 금지됩니다.; 용액은 한 번에 분배되어야 합니다. 희석된 작업 용액저장하면 안 된다; 즉시 준비하고 사용해야 합니다.
상태 관찰: 재구성 후 용액은 투명하고 약간 유백색이어야 합니다. 응집 물질, 입자 또는 탁도가 존재한다는 것은 단백질이 변성되고 응집되었음을 의미하므로 용액을 폐기해야 합니다.
2. 보관조건:
재구성되지 않은 동결건조 분말:
저장만 가능: -80도(급냉동). -20도에 보관하지 마십시오.
유통기한: -80도에서 12개월.
빛으로부터 엄격하게 보호하세요.: 내부에 방습제가 들어 있는 원래의 차광-알루미늄 호일 백에 넣어 보관하세요.
재구성된 용액:
즉시 디스펜싱:디스펜싱5분 안에 완료해야 함재구성 후.
재포장해서 냉동했어요: -80도에서만 보관 가능, 최대 유효 기간은 2주이며 보관을 권장하지 않습니다.
보관은 엄격히 금지됩니다: 희석된 작업용액은 반드시저장되지 않는다얼음 위에 보관하고 4시간 이내에 사용해야 합니다.
운송 조건:
운송해야합니다아래에드라이아이스(-78도) 조건.
포장에는 충분한 드라이아이스와 단열재가 있어서 공정 내내 해동되지 않도록 해야 합니다.
3. 안정성 및 처리 기준:
물리화학적 안정성:
이는 pH에 민감하며산성 pH(4.0-5.0)에서만 안정하고 용해됩니다.. 중성 및 알칼리성 pH에서 쉽게 응집되고 침전됩니다.
열적, 기계적 스트레스(와류, 진동, 버블링)와 반복되는 동결{0}}해동 주기에 매우 민감합니다.
표면 흡착에 민감하므로 담체 단백질과 저-흡착 용기를 사용해야 합니다.
생체 활성 유지:
네 가지 원칙: "산성 용해, 담체 보호, 저온-온화함, 동결-해동 주기의 엄격한 금지 ".
필요무엇이든 연락주세요우리를
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